Reagente para clarificação de tecidos em plantas ClearSeeTM

O Dr. Daisuke Kurihara (Universidade de Nagoya) desenvolveu uma solução para clarificar os tecidos das plantas, denominada ClearSee^TM.  Esta solução diminui a autofluorescência da clorofila, mantendo a estabilidade da proteína fluorescente e das estruturas dos tecidos das amostras de plantas. ClearSeeTMé aplicável a imagens multicoloridas profundas de várias amostras de plantas não cortadas.

Tipo de transporte e armazenamento: Manter em temperatura ambiente

Características

• O procedimento é de apenas 3 etapas
• Todos os microscópios de fluorescência podem ser usados.
• As amostras tratadas com ClearSeeTM podem ser armazenadas em longo prazo (pelo menos 6 meses).
• As amostras tratadas com ClearSeeTM podem ser observadas várias vezes
• Depois de executar o procedimento de clarificação das amostras seguindo as etapas: Fixação, Lavagem e Clarificação; a amostra deve ser observada da seguinte maneira:
• Colocar vaselina sobre a lâmina
• Transferir as amostras tratadas com ClearSee^TM sobre a lâmina
• Cobrir com lamínula e selar com uma lamínula com vaselina
• Observar a amostra tratada com ClearSeeTM em um microscópio fluorescente

ClearSee^TM é aplicável a várias espécies de plantas diferentes de Arabidopsis. A Figura 11 mostra as folhas de Torênia e Petúnia tratadas com ClearSeeTM. Tabaco, tomate, pepino e arroz após 6 dias de incubação. No caso do arroz, é necessária a remoção da cera cuticular para a penetração da solução. Mergulhe as amostras de arroz em um solvente orgânico, como clorofórmio, por 10 a 30 segundos e, em seguida, fixe-o com uma solução fixadora.