Kit para isolamento de microRNA, Humano Ago2

Com este kit, é possível preparar frações de microRNA de alta pureza, que são ligadas à proteína Argonauta 2 (hAgo2) pelo método de imunoprecipitação usando o anticorpo monoclonal anti-hAgo2. O miRNA obtido com este kit contém muito pouca contaminação de fragmentos de rRNA e tRNA.

Tipo de transporte e armazenamento: Temperatura 2-10°C, Não Perigoso

Características:

  • Alta purificação do miRNA
  • Específico para Ago2 Humano
  • Baixa contaminação de outros RNAs

O Kit contém:

  1. Solução - Esferas Anticorpo Anti-Ago2 Humano - 1 frasco x 500 µL
  2. Solução para lise celular 1 frasco x 50 mL
  3. Solução de eluição para 1 frasco x 500 µL
  4. Solução de Ethachinmate 1 frasco x 30 µL
  5. Acetato de Sódio 3 mols/L 1 frasco x 400 µL

Descrição e aplicação

O microRNA (abreviação miRNA) é um RNA de fita única que não codifica proteínas, com 21 a 25 nucleotídeos de comprimento, encontrado em plantas, animais e alguns vírus. Esse miRNA tem a capacidade de regular a expressão gênica através dos seguintes processos:

  • Degradação de proteínas durante a tradução
  • Inibição do alongamento da tradução
  • Término prematuro da tradução (desagregação de ribossomos)
  • Inibição do início da tradução

Sugere-se que existam mais de 1.000 tipos de miRNA em humanos e camundongos, vários cientistas identificaram novos miRNAs com funções ainda não conhecidas, explicando que as funções associadas a doenças específicas estão progredindo em todo o mundo. Recentemente, a descoberta do miRNA sérico abriu a possibilidade de usar o miRNA como um biomarcador, mesmo em doenças como o câncer. Considera-se que os microRNAs degradam a cadeia do RNA mensageiro (mRNA) ou inibem a tradução da seguinte maneira:

  • Os miRNAs amadurecem através de várias passagens na célula e são incorporados a um complexo de proteínas, chamado Complexo Silenciador Induzido por RNA (RISC), que é composto por miRNAs e proteínas da subfamília argonauta, que são o principal componente de RISC, seguido de ligação a um mRNA em branco.

Existem quatro tipos de subfamílias Argonauta em humanos, hAgo1 a hAgo4, que são expressos simultaneamente, mesmo que os níveis de expressão variem entre os tipos. Dentro dessas famílias, Ago2 é o mais amplamente expresso e considera-se que tenha um papel muito importante na cadeia de reação do miRNA, porque possui a capacidade de cortar os RNAs em branco selecionados. Enquanto o RISC é imunoprecipitado com anticorpos contra essas proteínas Ago, o miRNA pode ser recuperado desse precipitado RISC para ser estudado e analisado.

Como funciona?

Características

  1. Imunoprecipitação de proteína endógena Ago
  2. miRNA altamente purificado se liga à proteína Ago
  3. Baixa contaminação de outros RNAs
  4. Aplicável à clonagem de microRNA altamente eficiente e microarrays com frações de microRNA purificadas.

A Wako oferece ferramentas para analisar a função dos miRNAs, principalmente usando anticorpos Anti-Ago2. A combinação dessas ferramentas permite análises abrangentes dos miRNAs e dos mRNAs encontrados em RISCs existentes em células e tecidos.

Procedimento: