Kit para extração de mtDNA (DNA mitocondrial) de amostras de cultura ou tecidos

O DNA mitocondrial (mtDNA) ou genoma mitocondrial é encontrado nas mitocôndrias, os elementos da célula que geram energia para a mesma. É um material genético circular fechado de fita dupla encontrado em estruturas fora do núcleo.

As mitocôndrias são, na realidade, bactérias antigas que entraram nas células primitivas quando ainda eram células vivas individuais (cerca de três milhões de anos atrás), que formaram uma relação simbiótica na qual as mitocôndrias vivem como bactérias dentro de nossas células.

Uma vez que essas bactérias possuem seu próprio sistema de informação, que é o DNA, elas convertem essas informações em estruturas na forma de RNA e depois em proteínas.

Tipo de transporte e armazenamento: Refrigerado entre 2º e 10 ° C

As mitocôndrias e o DNA mitocondrial não são transmitidos ao longo dos cromossomos encontrados na maioria dos genes nas células; estas são herdadas diretamente da mãe através do óvulo durante a fertilização. Isso ocorre porque o óvulo possui cerca de 200.000 mitocôndrias, enquanto os espermatozoides possuem apenas alguns e os que entram no óvulo são destruídos. Portanto, as mitocôndrias e seu DNA são herdados exclusivamente da mãe.

Princípio de extração do DNA

Sabe-se que o DNA mitocondrial pode apresentar variações independentes do DNA genômico e participar do aparecimento de doenças como diabetes, Alzheimer e distúrbios musculares. Pensa-se que a distribuição do mtDNA seja diferente entre os tecidos e até entre as células. É por isso que é necessário colher amostras de diferentes tecidos e células para estudar as relações entre doenças, mtDNA e suas variantes. No entanto, os métodos de purificação de mtDNA existentes consistem em manipulações tediosas e inapropriadas para isolamento simultâneo de mtDNA de várias amostras. O kit de extração do mtDNA foi projetado para isolar o mtDNA de uma variedade de células e tecidos com alto desempenho e qualidade em apenas uma hora.

Materiais de teste

Culturas celulares e diferentes tipos de tecidos.

Características do Kit

• Isolamento do mtDNA com facilidade e em pouco tempo
• O mtDNA é tão puro que pode ser aplicado imediatamente em experimentos com enzimas de restrição e PCR.
• É possível extrair o mtDNA de tecidos a partir de 5mg para ser amplificado por PCR. O mtDNA isolado de 50 mg de tecidos não musculares (250 mg) pode ser detectado por eletroforese em agarose com coloração com brometo de etídio (coloração EtBr).
• Este método pode ser usado com amostras congeladas ou frescas.
• A preparação é realizada sem materiais perigosos, como clorofórmio e fenol líquido.

Conteúdo do Kit

1. Tampão para homogeneizar 1 frasco X 25mL
2. Solução de extração de DNA I 1 frasco X 1,3 mL
3. Solução de extração de DNA II (A) 1 frasco X 1,3 mL
4. Solução de extração de DNA II (B) 1 frasco X 1,3 mL
5. Solução de extração de DNA III 1 frasco X 1,9 mL
6. Solução de Iodeto de Sódio 1 frasco X 7,5 mL
7. Solução de lavagem 1 frasco X 50mL