Reagentes químicos úteis em ensaios analíticos

Existem muitos métodos de análise química. Estes dividem-se segundo diferentes critérios: em quantitativos e qualitativos, por exemplo, se a determinação produz um resultado numérico ou se simplesmente responde a uma pergunta de positivo ou negativo. Estes métodos classificam-se, por sua vez, em instrumentais, clássicos (onde se incluem os gravimétricos e volumétricos) e de separação. Outro critério muito utilizado é classificar os ensaios instrumentais segundo as propriedades que se medem para realizar a deteção daquilo que analisamos: assim temos métodos óticos, eletroquímicos e espectroscópicos.

Os métodos de separação mais utilizados atualmente são as técnicas cromatográficas. Entre as que se destacam temos, por exemplo, a cromatografia líquida de alta resolução ou HPLC, como é conhecida pelas siglas do inglês High Performance Liquid Chromatography, a espetroscopia de massa e a cromatografia de gases. Todas estas técnicas requerem o uso de solventes com um grau de pureza analítica e de muitos outros reagentes químicos que permitem obter resultados com precisão e exatidão.

A empresa Wako comercializa uma grande quantidade de reagentes químicos que se utilizam nos ensaios analíticos. A pureza dos reagentes destinados a análises varia segundo o ensaio a que irão ser submetidos, sendo, por regra geral, produtos de elevado grau de pureza - na maioria dos casos superior a 99%. As características dos reagentes, como o grau de humidade e possíveis vestígios especificam-se em cada reagente químico. É importante recordar que todos os reagentes químicos que se descrevem neste artigo são comercializados para o uso em investigação.

As investigações relacionadas com os ácidos gordos trans aumentaram nas últimas décadas pela incidência de doenças cardíacas na população. Sabe-se que o consumo de ácidos gordos trans influi na hipercolesterolémia e no risco de arteriosclerose, pelo que a análise química deste tipo de compostos é muito usual em laboratórios de investigação. Com este propósito a Wako comercializa os derivados trans do metil-linoleato e o alfa metil-linoleato, standards utilizados na análise por HPLC para confirmar a posição do resto de ácidos gordos trans. O padrão de ácido heptadecanóico, utilizado também como padrão interno na análise de alimentos, é outro dos reagentes desta linha. Assim como os metil-estéres de ácidos gordos (palmítico, esteárico, oleico, entre outros), que são utilizados tanto em cromatografia de gases como em outras técnicas de análise de matrizes alimentares.

Os triglicéridos (TAG) que compõem os azeites vegetais são compostos que têm demonstrado uma grande importância nos últimos anos pelas investigações relacionadas com as doenças cardíacas, à semelhança dos ácidos gordos trans. Também se revelam importantes em todas as investigações que se têm vindo a realizar para obter biocombustíveis. Neste caso a Wako oferece uma vasta gama de TAGs e, além disso, conta com um serviço de síntese específica a pedido do cliente, todos com elevado grau de pureza e que podem ser utilizados em ensaios analíticos.

Para a análise de aldeídos voláteis, a Wako desenvolveu uma linha de produtos que permitem desde recolher as amostras até derivar os aldeídos ao fazê-los reagir com a 2,4-fenilhidracina formando as dinitrofenilhidrazonas correspondentes e, posteriormente, realizar a análise por HPLC ou cromatografia gasosa. Entre os reagentes químicos que se vendem com este fim, encontra-se o acetonitrilo livre de aldeídos, os derivados dos aldeídos mais comuns para serem utilizados como controlo, colunas cromatográficas e os reagentes necessários para recolher as amostras gasosas e encher as colunas.

Outro standard analítico que a Wako comercializa é o dimetil fumarato de alta pureza para ser utilizado em análises de móveis e outros produtos de uso diário. O (E)-butenodioato de dimetil, mais conhecido como dimetil fumarato, é responsável pelas alergias originadas pelos móveis que contêm bolsas desta biocida para assegurar que mantinham a qualidade durante o armazenamento e transporte. Nos últimos anos detetaram-se casos de pessoas que sofrem dermatites de difícil tratamento devido a esta substância química, pelo que se realizam investigações sobre a toxicidade do dimetil fumarato. Em todos os ensaios analíticos que se realizam com este composto é necessário contar com um padrão do mesmo.

A Wako também conta com uma extensa linha de produtos para a análise de proteínas dos quais destacaremos alguns de seguida:

• Kit para a análise por espectrometria de massa baseado no uso de Phos-Tag (Phos-Tag™ Mass Analytical Kit). O Phos-Tag é uma molécula que se liga seletivamente aos grupos fosfatos que formam parte da estrutura das proteínas. O Phos-Tag forma um complexo metálico de grande estabilidade a pH fisiológico com as proteínas fosforiladas. Além do kit para a análise espectrométrica existem outros reagentes que incluem Phos-Tag para utilizar noutro tipo de ensaios analíticos. Estes reagentes permitem medir a quantidade de proteínas fosforiladas em diversos meios, característica que proporciona aos investigadores informações sobre mecanismos biológicos e permite ser utilizado como biomarcador em determinadas doenças. Por exemplo, na doença de Alzheimer, onde a concentração da proteína Tau fosforilada e hiperfosforilada é uma medida do estado de avanço da doença.

• SuperSep™ que é um gel de poliacrilamida para electroforese de proteínas. Este gel não contém SDS (dodecilsulfato de sódio), pelo que pode ser usado para eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) num buffer que contenha SDS ou para uma eletroforese em gel de poliacrilamida num outro buffer que não contenha SDS. A Wako tem à disposição dos seus clientes 12 tipos diferentes de gel para a separação de proteínas e ácidos nucleicos mediante esta técnica.

• Reagentes liofilizados e soluções prontas para uso para utilizar em eletroforese de proteínas: acrilamida em diferentes concentrações e graus de pureza, N,N,N',N'-tetrametiletillendiamina, buffers, etc. Inclui reagentes para o pré-tratamento das amostras, para eliminar os mucopolissacáridos e ácidos nucleicos de extratos de amostras de plantas, animais e microrganismos (Proteome Preparation Reagent) e o reagente de preparação de proteínas hidrofóbicas (Hydrophobic Protein Preparation Reagent) utilizado para acelerar o processo de solubilidade de proteínas hidrofóbicas e obter pontos bidimensionais na eletroforese que não seriam possíveis com métodos tradicionais.

• Reagentes para a análise de Western Blot: reagentes bloqueantes, soluções de lavado, anticorpos secundários de vários tipos, regentes aceleradores das reações antigénio-anticorpo e outros reagentes necessários para o reconhecimento de proteínas mediante esta técnica analítica.

• Reagentes para análise de proteínas por espectrometria de massa. Como exemplo, neste caso, podemos fazer menção às lisil endopeptídases que aparecem no catálogo da Wako. Contam, além disso, com uma ampla gama de solventes de grau analítico para análise por cromatografia liquida e espectrometria de massa, entre outros reagentes necessários para realizar uma análise espectrométrica.

Para a análise de frutooligossacáridos (FOS) que podem estar presentes em alimentos e bebidas, a Wako comercializa um set de três frascos que contêm 1-kestose, nistose e 1F-frutofuranosil nistose. Os FOS, juntamente com outros oligossacárido, formam parte dos designados pré-bióticos, que são ingredientes dos alimentos que fazem com que aumente o número de microrganismos que formam parte da flora intestinal e são benéficos para a saúde.

REAGENTES DE LABORATÓRIO PARA PADRÕES ANALÍTICOS

Padrão de geosmina – análise de água	Série de padrões de frutooligossacarídeos	Padrão de esteviosídeo (análise de alimentos)