Adsorção de proteínas: o que é e como evitá-la

O uso de material plástico no laboratório tornou-se popular, muitas vezes acima do material de vidro, graças às suas vantagens particulares: é mais resistente a choques, mais leve e geralmente mais barato. Com o material de uso único, o objetivo é reduzir a contaminação cruzada das amostras entre diferentes experimentos, bem como evitar a contaminação por microrganismos no caso de material estéril.

Ao longo dos anos, tem sido relatado que o plástico de tais materiais pode gerar contaminação por percolação de substâncias a partir do processo de polimerização, moldagem ou revestimento do material. A liberação de biocidas, agentes deslizantes e agentes antiestáticos de tubos de plástico, ponteiras de micropipetas e até filtros foi documentada.

Outro problema é a adsorção de proteínas e peptídeos nas paredes do recipiente. Isso se deve à sua diversidade de motivos hidrofóbicos e hidrofílicos, que podem interagir com a superfície do material e afetar a quantidade disponível da proteína ou peptídeo, seja de uma biomolécula, como insulina, a ser administrada em uma dose fixa; interferir na quantificação de um peptídeo ou proteína em um teste de diagnóstico ou diminuir os rendimentos em um procedimento de obtenção.

Algumas estratégias para diminuir a adsorção de proteínas e peptídeos ao material plástico são:

  • Fazer testes e escolher o melhor tipo de material. Os peptídeos e proteínas podem interagir com a superfície dos polímeros por sua natureza anfifílica. Atualmente, o material descartável de laboratório é elaborado com polímeros de poliestireno, polipropileno, polietileno de baixa e alta densidade, polietileno tereftalato e polimetilpenteno, entre outros. Ao testar diferentes plásticos, é possível determinar o tipo de material que terá a menor adsorção para uma amostra e usar esse material de forma consistente.
  • O uso de albumina de soro bovino. Em alguns casos, foi testado revestir o material plástico com ASB ou outros extratos proteicos; enquanto em outros, e desde que não interaja com a amostra, até 1% de ASB é adicionado à solução, buscando cobrir os potenciais locais de interação inespecífica do material.
  • Revestimento de silicone. Neste caso, busca-se cobrir os locais de interação com derivados de silano através da formação de ligações covalentes com a superfície do material.
  • Usar plástico de baixa adsorção. Existem no mercado materiais plásticos pré-tratados para evitar a adsorção à superfície. Embora devam ser testados com cada amostra específica, eles representam uma alternativa simples e rápida.

Fujifilm Wako oferece a linha ProteoSave® de produtos com baixa Adsorção de Proteínas. Contamos com:

  • tubos para centrífuga de 15 mL (MS-52150)
  • microtubos de 0,5 e 1,5 mL, esterilizados por radiação ou não esterilizados
  • frascos de 1,5 mL (MS-4202X)
  • microplacas de 96 poços (MS-8296F)

O material é pré-revestido com um polímero ultra-hidrofílico ligado covalentemente à superfície que impede a adsorção inespecífica. Da mesma forma, nossos produtos podem ser usados com diversos solventes, garantindo sua resistência e que não haja desprendimento do revestimento.

 

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Bibliografia

Goebel-Stengel, M., Stengel, A., Taché, Y., & Reeve Jr, J. R. (2011). The importance of using the optimal plasticware and glassware in studies involving peptides. Analytical biochemistry, 414(1), 38-46.

McDonald, G. R., Hudson, A. L., Dunn, S. M., You, H., Baker, G. B., Whittal, R. M., ... & Holt, A. (2008). Bioactive contaminants leach from disposable laboratory plasticware. Science, 322(5903), 917-917.

Pillai, S., Arpanaei, A., Meyer, R. L., Birkedal, V., Gram, L., Besenbacher, F., & Kingshott, P. (2009). Preventing protein adsorption from a range of surfaces using an aqueous fish protein extract. Biomacromolecules, 10(10), 2759-2766.