5 dicas para obter os melhores resultados da análise CG-EM

A cromatografia é uma técnica de separação usada há quase cem anos na qual podemos usar diferentes tipos de fases, variando suas polaridades para conseguir a separação de um grande número de compostos. A chamada fase estacionária refere-se àquela com a qual esperamos que nossos compostos interajam com maior ou menor afinidade, e normalmente é uma peça intercambiável de nosso equipamento. A fase móvel será aquela em que diluímos ou suspendemos nossa amostra, e cuja polaridade podemos modificar gradativamente.

No caso da cromatografia gasosa, a fase móvel é um gás inerte que carregará diferentes componentes da nossa mistura problemática em diferentes velocidades dependendo de sua maior ou menor interação com a fase estacionária. Pode ser uma coluna empacotada, caso em que as moléculas interagem com o sólido, ou uma coluna capilar, que possui uma fina camada de líquido. O gás se move pela coluna em alta pressão e com fluxo determinado.

Para verificar a separação dos compostos em uma mistura, é necessário ter outro equipamento que nos permita detectar sua eluição. No caso de um espectrômetro de massa, poderemos saber a relação massa/carga dos compostos separados, o que nos indicará sua massa. Uma análise mais cuidadosa nos dará pistas sobre sua estrutura e até mesmo nos permitirá identificá-los. Para isso, é necessário que as moléculas a serem detectadas sejam pequenas, voláteis e resistam à decomposição em altas temperaturas. Além disso, para obter uma boa separação, estas devem estar presentes em baixas concentrações.

Ao realizar esta análise com um procedimento bem estabelecido e atenção aos detalhes, podemos obter excelente reprodutibilidade e resultados quantitativos altamente confiáveis para as áreas de controle de qualidade.

Alguns dos aspectos a serem considerados para obter os melhores resultados possíveis:

1. Escolher a coluna mais adequada. Se fizermos uma análise específica, nossa metodologia pode nos dizer qual coluna usar. Caso contrário, devemos considerar a polaridade e a faixa de concentração de nossos analitos, a fim de escolher a coluna com a menor polaridade possível que consiga a separação, e o diâmetro interno e a espessura do filme que permitam a separação das concentrações esperadas.
2. Eliminar possíveis contaminantes da amostra. Em alguns casos, a amostra a ser analisada vem de uma matriz complexa onde podem estar presentes interferências. Uma etapa anterior de extração em fase sólida é muito útil. Na Fujifilm Wako, armazenamos uma grande variedade de colunas embaladas da série Presep ®C.
3. Cuidado com o fluxo. A obtenção de uma boa separação e quantificação dependerá da largura dos picos de eluição. Podemos melhorar isso controlando o fluxo da fase móvel. A primeira coisa será tomar cuidado se devemos usar fluxo ou pressão constante. Caso haja necessidade de adaptação do método, além de tentativa e erro, podemos contar com equações ou calculadoras da internet.
4. Usar padrões internos. Embora o detector de EM sincronizado com uma biblioteca de compostos nos permita identificar os componentes de uma mistura, podemos garantir a confiabilidade e reprodutibilidade de nossos resultados incluindo um padrão interno ou uma mistura deles em nossa análise. 
5. Derivatização. Alguns analitos com grupos funcionais polares podem ser pouco voláteis ou instáveis em altas temperaturas. Ao derivatizá-los, podemos melhorar a sensibilidade de sua detecção.

Entre em contato para saber mais sobre a ampla variedade de padrões e agentes de derivatização que temos à sua disposição.

Bibliografia.

Niessen, W. M. (Ed.). (2001). Current practice of gas chromatography-mass spectrometry. CRC Press.