Imunologia. Parte 2: Biomarcadores moleculares

Pode ser encontrada na literatura diversas definições precisas para o termo "biomarcador". Entre elas, a Organização Mundial de saúde, no seu relatório sobre a validade dos biomarcadores na avaliação de risco ambiental, os declara como "... quase qualquer medida que reflita uma interação entre um sistema biológico e um perigo potencial, que pode ser químico, físico ou biológico. A resposta medida pode ser funcional e fisiológica, bioquímica a nível celular, ou uma interação molecular... e também está associada com a probabilidade do desenvolvimento de uma doença." Dito isto, exemplos dos mais renomados biomarcadores são a pressão arterial, o colesterol (ambos como medidas do estado cardiovascular) e a glicemia como indicador de diabetes mellitus.

O uso de biomarcadores moleculares na prática clínica e na pesquisa apresenta um crescimento exponencial. Os pesquisadores fornecem um especial interesse neles como uma ferramenta essencial para a predição, diagnóstico e tratamento de doenças.

A gama de aplicações é infinita. Estudos sobre os biomarcadores em todas as áreas das ciências biológicas aplicadas à medicina, desde a pesquisa e medicina do sono e ritmo circadiano até câncer, passando pelas doenças cardiovasculares, neurodegenerativas, imunológicas e de origem microbiana. Vários exemplos podem ser mencionados: a Fibronectina celular (Fn-c) como um marcador de dano endotelial e transformação hemorrágica na isquemia cerebral; na detecção de neurotoxicidade, inibindo a acetilcolinesterase (AChE) por pesticidas anticolinesterásicos; marcadores de inflamação como a Proteína C-reativa (PCR), que não só marca a arteriosclerose e o risco vascular, mas também participa na patogênese da doença e de outros marcadores de fase aguda como fibrinogênio e amiloide A sérico, e as moléculas de adesão como o fator de necrose tumoral (TNF) e a interleucina-6 (IL-6); os lipolissacarídeos são usados como biomarcadores na translocação bacteriana e entre aqueles imunológicos associados às células T, as células T CXCR5+ mediam a imunidade protetora contra a tuberculose.

Os avanços genômicos e proteômicos aceleraram a compreensão dos mecanismos do sistema imunológico, bem como a biologia dos processos tumorais. Em relação ao câncer, a constatação de que os perfis de expressão de miRNA têm a capacidade de classificar com precisão os tumores, aumenta o seu potencial como biomarcadores. Ou, como no caso dos exossomos (nanovesículas extracelulares chaves na comunicação celular), cuja pesquisa os classifica como objetivos emergentes na terapia contra o câncer e o Alzheimer.

A empresa Wako constitui uma ligação primordial na busca incessante de novos biomarcadores. Ele faz isso através de uma variedade de equipamentos e reagentes para laboratório especializados, de uso exclusivo nas pesquisas, que coloca à disposição da comunidade científica.

Dentro da relação de biomarcadores, a Wako conta com a Superóxido Dismutase (Tipo Mn) (cat# 195-10291). Esta enzima (MnSOD) antioxidante essencial, localizada nas mitocôndrias, decompõe especificamente os radicais superóxido (O2 *-), protegendo a célula dos efeitos prejudiciais das espécies reativas de oxigênio e particularmente da disfunção mitocondrial. A MnSOD atua como um supressor de tumor durante os estágios iniciais e facilita a progressão nos estágios mais avançados. A compreensão do seu papel na função mitocondrial é a chave para o progresso de novas estratégias terapêuticas para o tratamento do câncer e outras doenças resultantes da disfunção mitocondrial.

DESTAQUE: Imunologia. Parte 1: Os anticorpos

A proteína marcadora olfativa (OMP) é uma proteína citoplasmática localizada nos neurônios receptores olfativos maduros de todos os vertebrados. É um modulador da via de transdução do sinal olfativo e significativo no desenvolvimento dos órgãos sensoriais olfativos. O anti-OMP da Wako [cat# 019-22291 (100uL)], é um antissoro de cabra altamente específico para neurônios olfativos maduros e seus axônios e terminais em cortes de tecidos de vertebrados. Obtido a partir de uma cabra imunizada com OMP de roedor. O antissoro é diluído 1:1 com glicerol contendo azida sódica 0,05% para facilitar seu carreamento.

Entre os kits de reagentes para o teste simultâneo de amostras estão o ALP LabAssay™ [cat# 291-58601 (determinação da fosfatase alcalina usando p-nitrofenilfosfato como substrato)]; Creatinina LabAssay™ [cat# 290-65901 (determinação quantitativa de creatinina no soro de camundongo ou urina baseada no método in vitro colorimétrico de Jaffe)]; Glicose LabAssay™ [cat# 298-65701, (determinação de glicose no soro, plasma ou urina de camundongo pelo método enzimático)] e Triglicerídeos LabAssay™ [cat# 290-63701 (determinação quantitativa de triglicérides no soro de camundongo pelo método enzimático com sal sódico N-etil-N(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5-dimetoxianilina)].

Mas a amplitude do catálogo da Empresa Wako não está restrita às moléculas; sua diversidade abrange equipamentos úteis para a detecção e/ou determinação destas. Tal é o caso, por exemplo, do Equipamento DNA Extractor TIS (cat# 296-67701) para a extração de DNA a partir de tecido parenquimatoso humano e animal na análise do marcador de estresse oxidativo 8-OHdG (8-hidroxi-2' -desoxiguanosina). Seu procedimento é baseado no iodeto de sódio, permitindo a extração segura (sem fenol/clorofórmio) e causando menos oxidação do DNA.

Bibliografia:

1) Rodewald, D. G. (2016). Distribution of olfactory marker protein in the rat vomeronasal organ. Journal of Chemical Neuroanatomy, 77(Noviembre), 19-23.

2) Aaron K. Holley, D. K. (2016). Manganese Superoxide Dismutase (MnSOD) and Its Importance in Mitochondrial Function and Cancer. En I. Batinić-Haberle, J. S. Rebouças, & I. Spasojević, Redox-Active Therapeutics (págs. 11-50). Switzerland: Springer International Publishing.

3) Baldisseri DM, M. J. (2002). Olfactory marker protein (OMP) exhibits a beta-clam fold in solution: implications for target peptide interaction and olfactory signal transduction. Journal of Molecular Biology, 319(3), 823-837.

4) Casadei, L., Creighton, C., Batte, K., Chelouche-Lev, D., Croce, C., & Pollock, R. (2016). Circulating exosomal miRNAs as potential biomarker in liposarcoma. 107th Annual Meeting of the American Association for Cancer Research. 76(14 suppl): Abstract 966. New Orleans: LA. Philadelphia (PA): AACR.

5) Castellanos Rodrigo, M. d. (21 de Junio de 2004). Moléculas inflamatorias y marcadores de lesión endotelial en la isquemia cerebral: participación en el deterioro neurológico y la transformación hemorrágica. Obtido em 20 de Fevereiro de 2017, da Tese de Doutorado na Web: http://www.tdx.cat/

6) Dijk, D. (2016). Biomarkers, old and new: for sleep, sleepiness, circadian phase and much more…. . Journal of Sleep Research, 25(3), 255–256.

7) Hamlett, E., Goetzl, E., Ledreux, A., Vasilevko, V., Boger, H., LaRosa, A., y otros. (Disponível online em 15 de outubro de 2016). Neuronal exosomes reveal Alzheimer's disease biomarkers in Down syndrome. Alzheimer's & Dementia.

8) Martín-Ventura, J., Blanco-Colio, L., Tuñón, J., Muñoz-García, B., Madrigal-Matute, J., Moreno, J., y otros. (2009). Biomarcadores en la medicina cardiovascular. Revista Española de Cardiología, 62, 677-688.

9) Michael J. Kerin, N. M. (2017). Patente nº US20170002428 A1. Detection and quantification of microRNAs in the circulation and the use of circulating microRNAs as biomarkers in cancer.

10) Organização Mundial da Saúde. (1993). Biomarkers and Risk Assessment: Concepts and Principles. Acessado em 20 de fevereiro de 2017, de IPSC INCHEM.

11) Slight, S. R., Rangel-Moreno, J., Gopal, R., Lin, Y., Fallert Junecko, B. A., Mehra, S., y otros. (2013). CXCR5+ T helper cells mediate protective immunity against tuberculosis. Journal of Clinical Investigation, 123(2), 712-726.

12) SS., A. (2011). Biomarcadores para la evaluación de riesgo en la salud humana. Rev. Fac. Nac. Salud Pública, 30(1), 75-82.

ALGUNS REAGENTES PARA IMUNOLOGIA

Anti-AGO2 humana	Anti-α-sinucleína fosforilada	Anti-AGO2 de camundongo