3 Kits de ELISA para biomarcadores de doenças relacionadas com o estilo de vida

As doenças relacionadas com o estilo de vida, principalmente da população que habita as zonas ocidentais, são muito comuns. Entre essas doenças, podemos mencionar a obesidade, o diabetes e as doenças cardiovasculares, por exemplo. Uma das formas de prevenir e diagnosticar as diferentes doenças associadas ao estilo de vida é controlar determinadas substâncias cuja concentração normal se altera como consequência da doença. Estas substâncias são conhecidas como biomarcadores, e os cientistas necessitam contar com procedimentos sensíveis e precisos para a determinação dos biomarcadores.

Uma das técnicas mais utilizadas na pesquisa para a detecção de moléculas que participam nos processos biológicos, como são os hormônios, os peptídeos e as proteínas é o teste de ELISA. A técnica de ELISA se desenvolveu na década de 60, como alternativa mais segura de análise, usando a radioatividade que era utilizada naqueles momentos. No ELISA se faz uso da especificidade da interação antígeno-anticorpo para determinar a concentração de um deles como analito de interesse. A detecção do analito é realizada mediante a marcação enzimática colorimétrica.

Os kits ELISA representam uma economia de tempo considerável para a pessoa que precisa realizar a análise, pois contêm todos os reagentes prontos para utilização. Ao comprar um kit ELISA, o pesquisador, além de evitar a preparação de soluções para conseguir com que os reagentes se encontrem nas concentrações adequadas para a análise, certifica-se de conseguir uma maior precisão e reprodutibilidade na análise.

Neste artigo são descritos três dos kits de ELISA que podem ser encontrados no catálogo da empresa Wako, que têm em comum seu uso em pesquisas de doenças relacionadas com o estilo de vida.

Kit de ELISA para proteína de transferência de ésteres de colesterol humano (Human CETP ELISA Kit)

A proteína de transferência de ésteres de colesterol, conhecido como CETP do inglês “cholesterylester transfer protein”, se associa ao risco de ter doenças cardiovasculares, assim como a aterosclerose. A função da CETP é a transferência de lipídeos entre as lipoproteínas e suas funções ainda são motivos de discussões científicas devido ao fato de que sua atuação pode ter tanto repercussão positiva na saúde da pessoa, como negativa. O kit de ELISA para CETP humana da Wako está baseado no imunoensaio enzimático tipo sanduíche, que permite uma fácil determinação de CETP no soro sanguíneo, exigindo apenas cerca de 4 horas para completar a análise. Podem-se obter medidas precisas até quantidades da ordem de 5 microgramas por mL.

Kit de ELISA para peptídeo C de rato (Rat C-peptide ELISA Kit Wako)

O chamado peptídeo C de insulina é um derivado da pro insulina que quando sofre processos metabólicos e passa à corrente sanguíneo tem quase a mesma molaridade que a insulina. Através da medição da concentração de peptídeo C se pode monitorar o nível de insulina secretados pelas células pancreáticas, no soro sanguíneo de ratos que são insulino-dependentes ou aos que foram administrados insulina. O peptídeo C é, portanto, um marcador biomolecular usado em pesquisas de diabetes. O kit de ELISA para peptídeo C de rato contém anticorpos de coelho e se baseia no princípio de reconhecimento por ELISA competitivo. O antígeno fixado na superfície reaciona com ele complexo formado com o peptídeo C de rato e o reconhecimento se produz por marcação com estreptavidina conjugada com peroxidase HRP. Com este kit se pode reconhecer o peptídeo C de rato e de outros animais não representam uma interferência, pelo que se pode assegurar que o reconhecimento é específico, e se pode efetuar o ensaio quando as quantidades são de nanogramas por mL. Para quantidades de peptídeos C ainda menores, da ordem de picogramos por mL, também se pode adquirir outro kit na Wako, o Rat C-peptide High Sensitive ELISA Kit.

Kit de ELISA para Apo B- 48 humana (Human Apo B-48 ELISA Kit)

Como Apo B-48 se conhece a polipoproteína B-48, que é uma das proteínas transportadoras de lipídeos mais estudiadas. A Apo B-48 forma parte dos quilomicrones, lipoproteínas que são capazes de transportar os triglicerídeos, o colesterol e outras moléculas gordurosas que comemos nos tecidos. Esta proteína é usada como biomarcador em estudos de diferentes problemas relacionados com o estilo de vida, como por exemplo, a obesidade.

Bibliografia:

1) Lewis, G.F., Rader, D.J., Circulation Research, 96(12), 1221-1232, 2005.

2) Kubota M, Sato Y, Khookhor O, Ekberg K, Chibalin AV, Wahren J., Diabetes Metab Res Rev., 30(2),124-31, 2014.

3) Chan DC, Wong AT, Pang J, Barrett PH, Watts GF., Clin Sci (Lond), 128(6), 379-85, 2015.

ALGUNS REAGENTES E KITS ELISA: