6 kit de extração de DNA e suas funções

22nd November 2013

6 kit de extração de DNA e suas funçõesAtualmente, a extração de DNA é uma técnica comum, devido à sua ampla utilização. É necessário se extrair o DNA para o diagnóstico de doenças, pesquisas paleontológicas, detecção de vírus e bactérias, e também para processos penais.

Os grandes avanços no campo da genética impuseram a necessidade de se desenvolver kits cada vez mais específicos para a extração de DNA, em inúmeros substratos. As funções de alguns destes kits, comercializados pela Wako, são descritos a seguir.

Kit de extração de DNA (DNA Extractor® Kit)

Kit de extração de DNA (DNA Extractor® Kit)Este kit se baseia no uso do método de iodeto de sódio para extrair DNA, tanto em soro como em biofármacos. Seu uso substitui o procedimento tradicional PK-SDS (digestão da mostra com protease K e uso de dodecil sulfato de sódio com detergente aniônico para solubilizar os restos celulares) para isolar o DNA das amostras líquidas; evitando o uso de solventes orgânicos tóxicos como o fenol e o clorofórmio.

O kit de extração de DNA pelo método de iodeto de sódio permite que a extração se realize em um tubo de microcentrifugação. Neste caso, o iodeto de sódio é o agente caotrópico e o N-lauril sarcosinato de sódio é o detergente aniônico, usado para solubilizar as proteínas e os lipídios contidos nas amostras biológicas. Como solvente orgânico é utilizado para a precipitação o isopropanol.

Kit de extração de DNA TIS (DNA Extractor® TIS Kit)

Kit de extração de DNA TIS (DNA Extractor® TIS Kit)É um teste concebido para a extração de DNA ligeiramente danificado, que pode ser utilizado, tanto em tecidos, como em culturas celulares. A sigla TIS no nome do kit é proveniente de tissue (tecido, em inglês). Este teste está baseado no método de iodeto de sódio e é útil para a detecção e determinação de 8-hidroxi-2'-desoxiguanosina (8-OHdG), que por ser um dos radicais livres predominantes na indução de lesões oxidativas é utilizado como biomarcador do estresse oxidativo e da carcinogênese. O 8-OHdG obtido com o uso deste kit pode ser quantificado mediante HPLC ou utilizando um teste ELISA, depois de realizar a digestão enzimática da amostra e, dessa forma, obter nucleosídeos puros. Este kit pode ser usado para a extração de DNA de tecido parenquimatoso humano e animal. Uma vantagem em relação à sua utilização é que se evita que o DNA extraído continue oxidando por conter um inibidor do processo de oxidação.

Kit de extração de DNA SP (DNA Extractor® SP Kit)

Kit de extração de DNA SP (DNA Extractor® SP Kit)Com este kit para a extração de DNA SP pode-se extrair o DNA livre de soro e plasma sanguíneo, daí a sigla SP. Este kit também utiliza o método de extração com iodeto de sódio. Sua principal vantagem é que se pode extrair praticamente 100% do DNA contido em uma pequena amostra de soro ou plasma. Este kit é destinado para suprir a necessidade de detectar os genes específicos de tumores de pulmão, de mama e de cólon, em amostras de soro e plasma, em pacientes afetados por estas doenças.

Kit de isolamento de DNA PS (DNA Isolator PS Kit)

Kit de isolamento de DNA PS (DNA Isolator PS Kit)O kit PS, cujo nome é proveniente de paraffin-embedded tissue section, permite isolar o DNA em amostras de seções de tecidos embebidos ou incrustados em parafina. O DNA isolado pode ser utilizado posteriormente para análise genética e para estudos epidemiológicos, em combinação com técnicas de amplificação de DNA. Este kit substitui o procedimento de parafinização e desproteinização das peças de tecidos fixadas, que implicam na utilização de técnicas muito rigorosas e demoradas. Seu uso permite isolar, em um período curto de tempo e através de um método sensível, em um só tubo, o DNA de cortes de tecido embebidos em parafina, sem usar solventes orgânicos tóxicos.

Kit de extração de DNA WB ( DNA Extractor® WB Kit)

Kit de extração de DNA WB ( DNA Extractor® WB Kit)Este kit de extração de DNA genômico é projetado para extrair o DNA de amostras de sangue total, daí a sigla de seu nome WB (whole blood, em inglês).

Além disso, pode ser utilizado com tecidos e culturas celulares. Em amostras de sangue se extrai tanto o DNA genômico, como o de grau baixo de oxidação.

A extração se realiza através do método de iodeto de sódio descrito anteriormente. Com este kit, se consegue isolar a fração nuclear, utilizando um surfactante que não seja aniônico; a liberação se realiza com protease e o DNA resultante se extrai com o iodeto de sódio.

Kit de extração de DNA FM (DNA Extractor® FM Kit)

Kit de extração de DNA FM (DNA Extractor® FM Kit)O nome deste kit é proveniente da sigla forensic medicine FM, já que sua principal utilização é a obtenção de DNA em amostras de medicina forense. As amostras de DNA são um fator-chave na medicina forense para a solução de casos legais, seja a identificação de corpos em maior ou menor grau de decomposição, ou a comprovação da presença de pessoas em um local determinado a partir de rastros biológicos, entre outros.

Os especialistas que desenvolvem a análise do perfil de DNA ou a impressão digital genética se deparam com inúmeras dificuldades: as amostras de DNA recolhidas podem estar parcialmente hidrolisadas ou terem passado por um processo de dano oxidativo, o DNA contido nas amostras pode ser muito escasso e as amostras geralmente contêm inibidores biológicos de natureza orgânica que interferem na determinação do DNA quando ele é extraído pelos métodos convencionais. Por todas essas razões, é muito importante poder contar com métodos que ajudem a obter DNA das diversas amostras com que se trabalha em medicina forense, com a menor perda possível.

O kit de extração de DNA FM Wako é uma ferramenta muito útil nas investigações forenses, e permite a determinação em um único tubo, evitando perdas por manipulação de DNA e possibilita que se possam dissolver as amostras em um período curto, sem utilizar solventes tóxicos. Ao se utilizar o método de iodeto de sódio para a extração de DNA se consegue purificar com um alto rendimento de recuperação. Além disso, com este kit se pode realizar a amplificação de DNA mediante a reação em cadeia com a polimerase proporcionando uma forma de desenvolver a análise quando existe escassez de DNA.

NOSSOS KITS DE DNA

Kit para extração de DNA Kit de extração de DNA SP  Kit para extração de DNA TIS
Kit para extração de DNA Kit de extração de DNA SP Kit para extração de DNA TIS

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Por: Lisa Komski Em: Produtos Wako